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多肽蛋白偶聯(lián)KLH, BSA, OVA
多肽抗原由于太小而不能產(chǎn)生顯著的免疫反應(yīng),因此需要將多肽抗原偶聯(lián)到KLH(Keyhole Limpet Hemocyanin)、BSA(Bovine Serum Albumin)、OVA(Ovalbumin)等較大的蛋白載體上。KLH由于在ELISA或Western blotting檢測中沒有抑制作用從而不影響檢測結(jié)果。常用的偶聯(lián)原理是順丁烯二酰亞胺理論, 即將多肽中的半胱氨酸殘基與載體蛋白偶聯(lián)。因此合成抗原多肽時(shí),在其N端或C端添加一個(gè)半胱氨酸殘基有利于多肽與載體蛋白的偶聯(lián)。
一般來說,多肽可以與蛋白偶聯(lián)的條件如下:
◆ Cys上的巰基(-SH)可以進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)(推薦)
◆ 或擁有一個(gè)未保護(hù)(自由)的氨基或羧基